肉毒素多为定点注射，即将针尖进入到相应层次后保持静止，缓慢推动活塞，注意量的控制，注射完毕后迅速拔出针头。

(一)垂直注射法

常用基本的注射法，可直接将肉毒素注射到较深的肌肉层次中。

1、进针

在画线点，垂直皮肤，干脆利落地将针头刺入相应的肌肉注射层，左手可辅助绷紧皮肤，以辅助右手进针。

2、回抽

应避免肉毒素进入小血管内，若回抽有血，应拔出针后按压止血，然后在附近点位另行注射。

3、注射

右手缓慢注射，注意注射量的控制，因注射部位及注射量的不同，患者会有不同程度的酸胀感及疼痛感。

4、退针

可用棉签或纱布轻放于注射针眼处，迅速将针拔出后，轻压几秒，拭去渗出的血液。

　　(二)成角注射法

常用于眼周等肌肉较薄区域，针尖斜面朝上，与皮肤呈一定角度进针，入针较浅，左手可辅助绷紧或提捏皮肤，以辅助右手进针，以避免刺入深层的其他肌肉，其余步骤要领同垂直注射法。

　　(三)多点微量表浅注射

多点微量表浅注射法是最近几年才被广泛应用的一种新注射法，手法与成角注射法相似，但注射更为表浅，是将药物注射在真皮深层，而非肌肉层，注射后应形成一小皮丘，单点的注射剂量也较少，即将原本作用于2~3点的肉毒素剂量分散于10~15个点进行注射。

该方法可显著减少一些近邻的面部表情肌肉群的连带副作用，可用于面部的细纹、面部提升、痤疮以及多汗症的治疗。

1、进针

在画线点，针尖朝上，与皮肤呈一定角度，干脆利落地刺入真皮深层，左手可绷紧皮肤，以协助右手进针，此时可见针的轮廓，但不应看见针的颜色。

2、注射

右手缓慢注射，注意注射量的控制，至出现一个小皮丘即可停止，患者的疼痛感较肌内注射要明显。

3、退针

可用棉签或纱布轻放于注射针眼处，迅速将针拔出后，轻压几秒，拭去渗出的血液与药液。

4、在其他注射点重复以上操作

注意：在使用多点微量注射法时，要计算好注射部位的总剂量，以避免过量、不足或双侧不对称等情况发生。

　　(四)线形逆行注射法

前三种方法均为散在的单点注射，即点积存注射法(depot injection)，线形注射法(threadinginjection)也是近些年来发展的一种较新的注射方法，即顺着肌肉解剖结构，行线形逆行注射，可使用更少的药物更均匀地麻痹相关肌肉，因而可获得比传统更自然和均匀的效果，但要求术者对肌肉的解剖定位的准确度更高，可适用于眉间纹、鱼尾纹等。